Disciplina detalhes

Detalhes do curso

Conhecimentos de Base Recomendados

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Objetivos

No final desta UC pretende-se que o estudante:
- compreenda o papel dos genes como a base molecular dos mecanismos de alteração genética e da sua importância fundamental para o estabelecimento da tecnologia do ADN recombinante;
- domine metodologias de Biologia Molecular e Engenharia Genética que são a base para análises genéticas e na investigação genética a nível molecular, nomeadamente identificação de serótipos, genótipos, etc.;
- que aplique as técnicas de ADN recombinante para clonagem em micro-organismos.
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Métodos de Ensino

Os conteúdos da UC são apresentados nas aulas teóricas, em modo expositivo intercalado com exemplos, recorrendo a suporte de diapositivos powerpoint e no corrente ano letivo, em modo online através da plataforma Zoom.
A componente laboratorial permite a ilustração prática dos conceitos teóricos. Nas aulas Laboratoriais são executados 3 grandes trabalhos que abrangem mais de que 1 aula/semana, priveligeando a estratégia de combinar a ilustração e execução das diversas técnicas descritas nos conteúdos programáticos, para um objetivo concreto. Os estudantes são integrados num projeto de investigação interdisciplinar que envolve outros cursos. Os produtos (material genético purificado, e/ou preparado com modificações) obtido nos seus trabalhos é usado como matéria prima por outros estudantes, que produzem outro material genético recombinante que por seu turno serve de amostra para ser analisado num dos últimos trabalhos laboratoriais.
São desenvolvidos trabalhos que ilustram as técnicas laboratoriais mais relevantes e a interpretação de resultados e resolução de problemas. As aulas laboratoriais podem ser concentradas em módulos de 4 a 6 horas.
Estágio(s)

Não
Programa

Componente teórica:
1. Introdução à Engenharia Genética.
2. Tecnologia de ADN Recombinante, papel das enzimas de restrição e vetores.
3. Métodos de visualização e quantificação de ácidos nucleicos: eletroforese em gel de agarose, Southern e Northern Blot.
4. Clonagem de genes.
5. Sistemas de expressão.
6. Bibliotecas de ADN.
7. Amplificação de ácidos nucleicos por PCR (técnicas qualitativas e quantitativas: qPCR, RT-PCR, Real Time-PCR).
8. Métodos de sequenciação
9. Terapia génica

Componente de Aplicação Laboratorial:
1. Extração de ácidos nucleicos (ADN genómico, ADN plasmídico e ARN)
2. Eletroforese em gel de agarose analítico e quantitativo;
3. Digestão de ADN com enzimas específicos – padrão de restrição;
4. Amplificação de amostras de ADN por PCR;
5. Clonagem de genes em vetores de expressão;
6. Recuperação de amostras de ADN de gel de agarose.
Demonstração de conteúdos

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Demonstração da metodologia

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Docente(s) responsável(eis)

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Bibliografia

T. A. Brown; Gene Cloning and DNA Analysis : An Introduction, Wiley Blackwell, , 2016. ISBN: 978-1-119-07256-0
Desmond S. T. Nicholl; An introduction to genetic engineering, Cambridge University Press, 2008. ISBN: 978-0-521-61521-1
Michael R. Green, Joseph Sambrook; Molecular cloning : a laboratory manual, CSH Press, 2012. ISBN: 978-193611342-2
Keith Wilson, John Walker; Principles and techniques of biochemistry and molecular biology, Cambridge University Press, 2010. ISBN: 978-0-521-73167-6
A. J. Nair; Introduction to biotechnology and genetic engineering, Jones & Bartlett Learning, 2008. ISBN: 978-0-7637-7375-5
Benjamin Lewin; Genes VII, John Wiley & Sons, 2000